本发明公开了一种西妥昔单抗突变体及应用。西妥昔单抗突变体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1～6任一所示。本发明获得的抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1～5所示的Cetuximab突变体对EGFR S492R有效，其中抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1、2所示的Cetuximab突变体效果优于Panitumumab。本发明获得的抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的Cetuximab突变体对EGFR G465R有效，且效果显著。本发明获得的抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1、2、6所示的Cetuximab突变体仍然保持对野生型EGFR的亲和力。

EGFR是一种重要的肿瘤靶点，与多种恶性肿瘤的发生和发展有关。目前，针对EGFR的抗肿瘤药物主要分为两大类，1.单克隆抗体。其通过与EGFR胞外域结合，阻断其与配体的相互作用，从而抑制下游信号通路的激活；2.小分子激酶抑制剂，其通过与EGFR胞内域的ATP结合位点竞争，阻断其酪氨酸激酶的活化，从而抑制下游信号通路的激活。
西妥昔单抗作为靶向EGFR的单克隆抗体药物在转移性结直肠癌的治疗中具有重要地位。近20年间，其安全性和有效性已在临床上得到广泛验证，已从三线治疗药物跃居至一线治疗药物。然而，在用药过程中EGFR胞外区耐药点突变的产生大大限制了西妥昔单抗的疗效，其中一些高频点突变如S492R、G465R可使西妥昔单抗完全失去结合EGFR的能力，患者用药后获益大打折扣。当前临床上仍缺乏有效的抗体新药应对EGFR胞外区点突变介导的西妥昔单抗耐药问题。而一个抗体新药的成功开发往往需要耗费长达十年时间，花费高达十亿美金。
因此，探索高效率的抗体药物开发策略用于开发能够有效逆转EGFR胞外区点突变耐药的抗体新药，并应对临床上越发频现的因靶标受体发生点突变而导致的耐药是迫切需要解决的临床问题。
研究团队针对行业痛点开发了计算机辅助设计的抗体快速定向进化技术，发现西妥昔单抗可变区上的一个或两个点突变即可逆转多种EGFR的获得性点突变耐药，西妥昔单抗突变体可完全恢复对耐药点突变受体的结合能力，同时保留原有抗体的其他生物学功能（如CDC、ADCC），从而以最小改动最大限度保留了抗体突变体的成药性。
该技术为临床上获得性点突变耐药提供了高效率解决方案，可极大加快抗体新药研发进程。